morphoМорфологические ведомостиMorphological newsletter1812-31712686-8741Private Medical University REAVIZ10.20340/mv-mn.2020.28(1):51-56morpho-425Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯRESEARCH ARTICLESРетроспективный анализ 563 эмбриологических протоколов криоциклов: влияние компетенции ооцитов и генетического скрининга эмбрионов человека на результаты витрификацииRetrospective analysis of 536 embryological protocols of cryocycles: the influence of oocyte competence and genetic screening of human embryos on vitrification resultsШурыгинаО. В.ShuryginaO. V.

Шурыгина Оксана Викторовна, доктор медицинских наук, профессор, заведующая лабораторией вспомогательных репродуктивных технологий, Медицинская компания ИДК; профессор кафедры гистологии и эмбриологии, Самарский государственный медицинский университет

Самара

Shurygina Oxana V.

Samara

oksshurygina@yandex.ruИвановаО. В.IvanovaO. V.

Иванова Ольга Викторовна, аспирант кафедры гистологии и эмбриологии

Самара

Ivanova Olga V.

Samara

pathologywinkie@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-2493-7872ЮхимецС. Н.YukhimetsS. N.

Юхимец Сергей Николаевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры морфологиии патологии

Самара

SPIN-код: 7981-4639

 

Yukhimets Sergei N.

The morphology and pathology department

Samara

y_s_n@reaviz.comЮлдашеваС. З.YuldashevaS. Z.

Юлдашева Сурая Зарифовна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры акушерства и гинекологии

maxfira@mail.ruРусаковД. Ю.RusakovD. Yu.

Русаков Дмитрий Юрьевич, кандидат медицинских наук, врач-уролог, Медицинская компания ИДК; старший преподаватель кафедры гистологии и эмбриологии, Самарский государственный медицинский университет

Самара

Rusakov Dmitry Yu.

Samara 

maison55@rambler.ruКулаковаО. В.KulakovaO. V.

Кулакова Олеся Викторовна, кандидат медицинских наук, доцент кафедры гистологии и эмбриологии

Самара

Kulakova Olesya V.

Samara

olesvk@mail.ruСамарский государственный медицинский университет; Медицинская компания ИДКРоссияSamara State Medical University; IDK Medical CompanyRussian FederationСамарский государственный медицинский университетРоссияSamara State Medical UniversityRussian FederationМедицинский университет РЕАВИЗРоссияPrivate Medical University REAVIZRussian FederationТашкентский педиатрический медицинский институтУзбекистанTashkent Pediatric Medical InstituteUzbekistan2020190320202815156Copyright © Шурыгина О.В., Иванова О.В., Юхимец С.Н., Юлдашева С.З., Русаков Д.Ю., Кулакова О.В., 20202020Шурыгина О.В., Иванова О.В., Юхимец С.Н., Юлдашева С.З., Русаков Д.Ю., Кулакова О.В.Shurygina O.V., Ivanova O.V., Yukhimets S.N., Yuldasheva S.Z., Rusakov D.Y., Kulakova O.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.morpholetter.com/jour/article/view/425

Достижения фундаментальной науки в последнее время получили наиболее широкое распространение в области репродуктивной медицины. Биология развития человека во многом стала понятной и управляемой благодаря новым технологиям. Часть раннего эмбриогенеза человека совершенно предсказуемо воспроизводится в лабораториях вспомогательных репродуктивных технологий. Тем не менее, несмотря на все достижения, успех рождения здорового ребенка не превышает 30% от начатых циклов. Именно поэтому идет постоянный поиск новых методик, их комбинаций для достижения лучших результатов и отработки стандартных протоколов ведения пациентов с бесплодием. Целью работы является анализ целесообразности выполнения генетического скрининга эмбрионов «Next generation sequencing» (далее - NGS) и сравнительный анализ эффективности использования донорских и собственных ооцитов при переносе одного эмбриона в криоциклах. Нами проанализировано 536 криоциклов. Было выделено 4 группы пациентов с переносом одного эмбриона (SET – single embryo transfer): 1-я группа - циклы с проведением NGS тестирования, в которых для отбора на перенос были взяты эмбрионы с генетически эуплоидным статусом с использованием собственных ооцитов (n=20); 2-я группа - циклы с переносом одного эмбриона без применения NGS и использованием собственных ооцитов (n=446); 3-я группа - циклы без применения NGS, с использованием донорских ооцитов (n=8). Группы 1, 2 и 3 имели сопоставимый возраст (34,1 - 34,3 - 34,6 лет соответственно). В связи с малочисленностью 3-й группы была взята еще одна (4-я) группа наблюдения (циклы без применения NGS, с использованием донорских ооцитов, n=62), но без возрастных ограничений, в которой средний возраст пациентов составил 42,3 года. При анализе частоты выживаемости она была значимо ниже в группе с использованием донорских клеток (3 группы), чем в группах 1 и 2 с собственными клетками (84,62% против 100%, p=0,060 и 91,96%, p<0,0001, соответственно). Разница в возрасте в группах с донорскими клетками (3 и 4) на частоту выживаемости значимо не влияла (84,82% и 92,94%, p=0,443). Различия в частоте с обнаружением хорионического гонадотропина «ХГЧ(+)» были обнаружены между группами с использованием донорских ооцитов (3 и 4 группы) и собственных ооцитов без генетического скрининга (2-я группа), в которых показатель был значимо ниже (62,5% и 62,98% против 41,03%, p<0,0001 в обоих случаях). Одинаковые значимые различия в частоте наступления беременности (ЧНБ) и частоты имплантации (ЧИ) были выявлены между 2-й группой (собственные ооциты без скрининга) и всеми остальными группами (1, 3 и 4). В последних, показатели были значимо выше, ЧНБ - 35,2% против 60%, 62,5% и 58,06% соответственно, и ЧИ - 36,36% против 60%, 62,5% и 56,45%, соответственно. Полученные результаты подтверждают определяющую роль компетенции ооцитов, демонстрируют отсутствие негативного влияния витрификации на эмбрионы после биопсии трофобласта и убедительно доказывают целесообразность и значительное положительное влияние генетического скрининга эмбрионов на клинические результаты.

 

The achievements of fundamental science have recently become the most widespread in the field of reproductive medicine. The biology of human development has mostly become understandable and manageable, thanks to new technologies. Some stages of the early human embryogenesis are predictably reproduced in the laboratories of assisted reproductive technologies (ART). Nevertheless, despite all the achievements, the success (birth of a healthy child) does not exceed 30% of the started cycles. That is why there is a continual search for new methods and their combinations to achieve better results and develop standard protocols for managing patients with infertility. The purpose of this work is to analyze the feasibility of genetic screening of embryos (NGS) and to compare the effectiveness of using donor and own oocytes when transferring a single embryo in cryocycles. We have analyzed the 536 cryocycles. There were four groups of patients with single embryo transfer (SET): group 1 - cycles with NGS, embryos with genetically euploid status taken for selection for transfer with used own oocytes (NSd, n=20); group 2 - cycles with single embryo transfer without NGS and using own oocytes (nSd, n=446); group 3 - cycles without NGS, using donor oocytes (nSD, n=8). All groups 1, 2, and 3 were near the same with an average age (34,1 - 34,3 - 34,6 years, respectively). Due to the small size of group 3, another (4th) observation group was taken (cycles without NGS, using donor oocytes, nSD, n=62), but without age restrictions, where the average age of patients was 42.3 years. Analyze of the survival rate shows significant decreasing in the group used donor cells (3 groups) than in groups (1 and 2) used own cells (84.62% vs 100%, p=0.060 and 91.96%, p<0.0001, respectively). The age difference in the groups with donor cells (3 and 4) did not significantly affect the survival rate (84.82% and 92.94%, p=0.443). We found differences in the rate of HCG(+) between groups using donor oocytes (groups 3 and 4) and own oocytes without genetic screening (group 2), where the indicator was significantly lower (62.5% and 62.98% vs 41.03%, p<0.0001 in both cases). The same significant differences in the pregnancy rate (PR) and implantation rate (IR) we found between group 2 (own oocytes without screening) and all other groups (1, 3 and 4). In the last groups, the indicators were significantly higher (PR - 35.2% against 60%, 62.5% and 58.06%, respectively, and IR - 36.36% against 60%, 62.5% and 56.45%, respectively). The results we obtained confirm the definitive role of oocyte competencies, demonstrate the absence of an adverse effect of vitrification on embryos after trophoblast biopsy, and convincingly prove the feasibility and significant positive impact of genetic screening of embryos on clinical results.

 

ооцитывитрификация эмбрионовгенетический скринингoocytesvitrification of embryosgenetic screeningReferencesIvanova OV, Shurygina OV, Rusakov DYu, Bykova TV, Petrova AA, Yukhimets SN, Kulakova OV, Yuldasheva SZ. Kriokonservatsiya biologicheskogo materiala cheloveka v praktike embriologicheskoy laboratorii. Morfologicheskie Vedomosti – Morphological Newsletter. 2019;27(3):46-50.Ciepiela P., Dulęba A.J., Kario A., Chełstowski K., Branecka-Woźniak D., Kurzawa R. Oocyte matched follicular fluid anti-Müllerian hormone is an excellent predictor of live birth after fresh single embryo transfer Hum Reprod, (2019) 34(11): 2244–2253Makarova NP. Avtoreferat diss… Morfologicheskie i molekulyarno- biologicheskie osobennosti postovulyatornykh ootsitov i ikh rol' v preimplantatsionnom razvitii embrionov cheloveka. 2019:46.Ernstad E.G., Spangmose A. L., Opdahl S., A., Romundstad L.B., Tiitinen A., Gissler M., Wennerholm U., Pinborg A., Т. Bergh, Malchau S.S. Perinatal and maternal outcome after vitrification of blastocysts: a Nordic study in singletons from the CoNARTaS group Hum Reprod, (2019) 34(11): 2282–2289Ciepiela P, Dulęba AJ, Kario A, Chełstowski K, Branecka-Woźniak D, Kurzawa R. Oocyte matched follicular fluid anti-Müllerian hormone is an excellent predictor of live birth after fresh single embryo transfer Hum Reprod. 2019;34(11):2244–2253.Hwang S.S., Dukhovny D., Gopal D., Cabral H., Diop H., Coddington C.C., Stern J.E. Health outcomes for Massachusetts infants after fresh versus frozen embryo transfer Fertil Steril (2019) 112(5): p. 900–907Ernstad EG, Spangmose AL, Opdahl S, Romundstad LB, Tiitinen A, Gissler M, Wennerholm U, Pinborg A, Bergh T, Malchau SS. Perinatal and maternal outcome after vitrification of blastocysts: a Nordic study in singletons from the CoNARTaS group Hum Reprod. 2019;34(11):2282–2289.Paulson R.J. Outcome of in vitro fertilization cycles with preimplantation genetic testing for aneuploidies: let’s be honest with one another Fertil Steril (2019) 112(6): 1013–1014 https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(19)32541-5/fulltextHwang SS, Dukhovny D, Gopal D, Cabral H, Diop H, Coddington CC, Stern JE. Health outcomes for Massachusetts infants after fresh versus frozen embryo transfer Fertil Steril. 2019;112(5):900–907.Scaravelli G., Levi-Setti P.E., Livi C., La Sala G., Ubaldi F. M., Greco E., Coccia M. E., Borini A., Revelli A., Ricci G., Vigiliano V., De Luca R., Bolli S., Rienzi L. Contribution of cryopreservation to the cumulative live birth rate: a large multicentric cycle-based data analysis from the Italian National Registry J Assist Reprod Genet (2019) 36(11): 2287–2295 https://link.springer.com/article/10.1007/s10815-019-01566-yScaravelli G, Levi-Setti PE, Livi C, La Sala G, Ubaldi FM, Greco E, Coccia ME., Borini A, Revelli A, Ricci G, Vigiliano V, De Luca R, Bolli S, Rienzi L. Contribution of cryopreservation to the cumulative live birth rate: a large multicentric cycle-based data analysis from the Italian National Registry J Assist Reprod Genet. 2019;36(11):2287–2295. https://link.springer.com/article/10.1007/s10815-019-01566-y.Sacchi M., Albani E., Cesana A., Smeraldi A., Parini V., Fabiani M., Poli M., Capalbo A., Levi-Setti P.E. Preimplantation Genetic Testing for Aneuploidy Improves Clinical, Gestational, and Neonatal Outcomes in Advanced Maternal Age Patients Without Compromising Cumulative Live-Birth Rate J Assist Reprod Genet (2019) 36(12) 2493–2504 https://link.springer.com/article/10.1007/s10815-019-01609-4Paulson RJ. Outcome of in vitro fertilization cycles with preimplantation genetic testing for aneuploidies: let’s be honest with one another Fertil Steril. 2019;112(6):1013–1014 https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(19)32541-5/fulltext.He H., Jing S., Fu Lu C., Qiu Tan Y., Li Luo K., Ping Zhang S., Gong F., Xiu Lu G., Lin G. Neonatal outcomes of live births after blastocyst biopsy in preimplantation genetic testing cycles: a follow-up of 1,721 children Fertil Steril (2019) 112(1): 82–88 https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(19)30249-3/fulltextSacchi M, Albani E, Cesana A, Smeraldi A, Parini V, Fabiani M, Poli M, Capalbo A, Levi-Setti PE. Preimplantation Genetic Testing for Aneuploidy Improves Clinical, Gestational, and Neonatal Outcomes in Advanced Maternal Age Patients Without Compromising Cumulative Live-Birth Rate J Assist Reprod Genet. 2019;36(12):2493-2504. https://link.springer.com/article/10.1007/s10815-019-01609-4.Zhang W.Y., Versen-Höynck F., Kapphahn K.I., Fleischmann R.R., Zhao Q., Baker V.L. Maternal and neonatal outcomes associated with trophectoderm biopsy Fertil Steril (2019) 112(2): 283–290. https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(19)30316-4/fulltextHe H, Jing S, Fu Lu C, Qiu TanY, Li LuoK, Ping Zhang S, Gong F, Xiu Lu G, LinG. Neonatal outcomes of live births after blastocyst biopsy in preimplantation genetic testing cycles: a follow-up of 1,721 children FertilSteril. 2019;112(1):82–88. https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(19)30249-3/fulltext.Carrasquillo R.J., Kohn T.P., Cinnioglu C., Rubio C., Simon C., Ramasamy R., Al-Asmar N. Advanced paternal age does not affect embryo aneuploidy following blastocyst biopsy in egg donor cycles J Assist Reprod Genet (2019) 36(3): 2039–2045 https://link.springer.com/article/10.1007/s10815-019-01549-zZhang WY, Versen-Höynck F, Kapphahn KI, Fleischmann RR, Zhao Q, Baker VL. Maternal and neonatal outcomes associated with trophectoderm biopsy FertilSteril. 2019;112(2):283–290. https://www.fertstert.org/article/S0015-0282(19)30316-4/fulltext.Gardner D.K., Schoolcraft W.B. In vitro culture of human blastocysts. Toward Reproductive Certainty: Fertility and Genetics Beyond. 1999; 11: 378–388.Carrasquillo RJ, Kohn TP, Cinnioglu C, Rubio C, Simon C, Ramasamy R, Al-Asmar N. Advanced paternal age does not affect embryo aneuploidy following blastocyst biopsy in egg donor cycles J Assist Reprod Genet. 2019;36(3):2039–2045. https://link.springer.com/article/10.1007/s10815-019-01549-z.Carrasquillo RJ, Kohn TP, Cinnioglu C, Rubio C, Simon C, Ramasamy R, Al-Asmar N. Advanced paternal age does not affect embryo aneuploidy following blastocyst biopsy in egg donor cycles J Assist Reprod Genet. 2019;36(3):2039–2045. https://link.springer.com/article/10.1007/s10815-019-01549-z.Gardner DK, Schoolcraft WB. In vitro culture of human blastocysts. Toward Reproductive Certainty: Fertility and Genetics Beyond. 1999;(11):378–388.Gardner DK, Schoolcraft WB. In vitro culture of human blastocysts. Toward Reproductive Certainty: Fertility and Genetics Beyond. 1999;(11):378–388.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.