morphoМорфологические ведомостиMorphological newsletter1812-31712686-8741Private Medical University REAVIZ10.20340/mv-mn.2025.33(3).974morpho-974Research ArticleМЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯRESEARCH METHODSМОДИФИКАЦИЯ МЕТОДА ИМПРЕГНАЦИИ СЕРЕБРОМ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭНТЕРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫTHE SILVER IMPREGNATION METHODS MODIFICATION FOR THE ENTERIC NERVOUS SYSTEM STUDYhttps://orcid.org/0000-0002-0374-780XМарковИгорь ИвановичMarkovIgor' I.

доктор медицинских наук, профессор, советник ректора

Doctor of Medical Sciences, Professor, the Rector Advisor

markovii2601@yandex.ruНизаметдиноваДинара РустамовнаNizametdinovaDinara R.

старший преподаватель кафедры морфологии и патологии

Senior Lecturer of the Morphology and Pathology Department

dinaranizametdinova@mail.ruМарковаВалерия ИгоревнаMarkovaValeriya I.

старший преподаватель кафедры морфологии и патологии

Senior Lecturer of the Morphology and Pathology Department

markova@reaviz.onlineМедицинский университет РЕАВИЗ, СамараРоссияREAVIZ Private Medical University, SamaraRussian Federation202502112025333id-974Copyright © Марков И.И., Низаметдинова Д.Р., Маркова В.И., 20252025Марков И.И., Низаметдинова Д.Р., Маркова В.И.Markov I.I., Nizametdinova D.R., Markova V.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.morpholetter.com/jour/article/view/974

Отсутствие адекватных методов гистологического исследования энтеральной нервной системы является значительным препятствием для получения достоверных результатов о ее структурной организации на микроскопическом уровне. Использование классических методов импрегнации азотнокислым серебром, к сожалению, не дает удовлетворительных результатов. Цель исследования – доказать эффективность универсального метода импрегнации в идентификации меж-нейрональных цитоплазматических синцитиальных связей в структурах энтеральной нервной системы человека. Изучены суправитальные препараты стенки кишечника беспородных половозрелых кошек (n=7) и биопсийные фрагменты тонкой и толстой кишки (n=30) длиной 20 см (тонкая кишка) и длиной 10 см (толстая кишка). Фрагменты кишечника после тщательной предварительной подготовки подвергались препарированию в водной среде под стереомикроскопом. Стенка фрагментов разделялась на слизистую и мышечную оболочки, и подслизистую основу. Каждая из оболочек, мышечная, слизистая и подслизистая основа фиксировались в 10% не содержащем метанол формалине в отдельном флаконе. Небольшие фрагменты кишечной стенки обрабатывают 0,2% растворами гидроксидов бария, кальция и магния, размещением их на смоченной этими растворами стекловате. Затем на поверхность фрагментов наносят капли растворов указанных растворов. Нитрата серебра осаждают в сильнощелочной среде (pH=11–13) с использованием 4% гидрохинона в качестве восстановителя. Образование и осаждение гидроокиси серебра происходит как за счет активности самого катиона, так и за счет еще более реакционноспособного аниона. В результате образуются плохо растворимые соединения, которые осаждаются на аргирофильных структурах. Восстановленное из гидроокиси металлическое серебро в виде кристаллов откладывается в точном соответствии с локализацией и концентрацией протравных соединений. Адаптированный метод универсальной импрегнации – результат нанотехнологического принципа искусственного перенаправленного метода коррекции естественных восстановительных свойств клеточных конструкций. Разработанный способ позволяет достичь значительно лучших результатов при изучении гистологических препаратов энтеральной нервной системы по сравнению с имеющимися.

The lack of adequate methods for histological examination of the enteric nervous system is a significant obstacle to obtaining reliable results on its structural organization at the microscopic level. The use of classical methods of impregnation with silver nitrate, unfortunately, does not provide satisfactory results. The aim of the study was to prove the effectiveness of the universal impregnation method in identifying interneuron cytoplasmic syncytial connections in the human enteric nervous system. We studied supravital preparations of the intestinal wall of mongrel mature age cats (n=7) and biopsy fragments of the small and large intestine (n=30) 20 cm long (small intestine) and 10 cm long (large intestine). After careful preliminary preparation, intestinal fragments were dissected in an aqueous medium under a stereomicroscope. The wall of the fragments was divided into the mucous and muscular membranes, and the submucosa. Each of the intestinal membranes, muscularis propria, mucosa, and submucosa were fixed in 10% methanol-free formalin in a separate vial. Small fragments of the intestinal wall were treated with 0.2% solutions of barium, calcium, and magnesium hydroxides by placing them on glass wool moistened with these solutions. Drops of these solutions were then applied to the surface of the fragments. Silver nitrate was precipitated in a highly alkaline medium (pH=11–13) using 4% hydroquinone as a reducing agent. The formation and precipitation of silver hydroxide occurs due to both the activity of the cation itself and the even more reactive anion. This results in the formation of poorly soluble compounds that precipitate on argyrophilic structures. Metallic silver, reduced from the hydroxide, is deposited in the form of crystals in precise accordance with the location and concentration of the mordant compounds. The adapted universal impregnation method is the result of a nanotechnological principle of an artificially redirected method for correcting the natural restorative properties of cellular constructs. The developed method allows for significantly improved results in the study of histological specimens of the enteric nervous system compared to existing methods.

энтеральная нервная системакишечникдомашняя кошкаметод импрегнациинитрат серебраReferencesAuerbach L. Feinere vorlaufige Mittheilung uber den Nervenapparat des Darmes. Arch. Pathol. Anat. Physiol. Klin. Med. 1864;30(3-4):453– 466Auerbach L. Feinere vorlaufige Mittheilung uber den Nervenapparat des Darmes. Arch. Pathol. Anat. Physiol. Klin. Med. 1864;30(3-4):453– 466Meissner G. Uber die Nerven der Darmwand. Ztschr. F. Ration Med. 1857;2(2):364–382Meissner G. Uber die Nerven der Darmwand. Ztschr. F. Ration Med. 1857;2(2):364–382Lilli R. Patologicheskaya tekhnika i prakticheskaya gistokhimiya. Per. s angl. M.: Mir, 1969.– 645s. In RussianLilli R. Patologicheskaya tekhnika i prakticheskaya gistokhimiya. Per. s angl. M.: Mir, 1969.– 645s. In RussianMazzarello P. Camillo Colgi’s Scintific Biography. I. Hist. Neurosci. 1999;8(2):2045–2060Mazzarello P. Camillo Colgi’s Scintific Biography. I. Hist. Neurosci. 1999;8(2):2045–2060Dogel' AS. Tekhnika okrashivaniya nervnoy sistemy metilenovoy sin’yu. SPb: Izd-vo K.L. Rikkera, 1902.- 48s. In RussianDogel' AS. Tekhnika okrashivaniya nervnoy sistemy metilenovoy sin’yu. SPb: Izd-vo K.L. Rikkera, 1902.- 48s. In RussianSotnikov OS. Ob"edinennaya neyro-retikulyarnaya teoriya. SPb: Nauka, 2019.– 239s. In RussianSotnikov OS. Ob"edinennaya neyro-retikulyarnaya teoriya. SPb: Nauka, 2019.– 239s. In RussianKolosov NG. Nervnaya sistema pishchevaritel’nogo trakta pozvonochnykh zhivotnykh. L.: Nauka, 1978.- 140s. In RussianKolosov NG. Nervnaya sistema pishchevaritel’nogo trakta pozvonochnykh zhivotnykh. L.: Nauka, 1978.- 140s. In RussianFayrter F. Uber die Pathologic Vegetativen nervous peripheral und ihren ganglionaren Regulatios. Wien, 1951.- 273SFayrter F. Uber die Pathologic Vegetativen nervous peripheral und ihren ganglionaren Regulatios. Wien, 1951.- 273SKorochkin LI. Differentsirovka i starenie vegetativnogo neyrona. M.: Nauka, 1965.- 186s. In RussianKorochkin LI. Differentsirovka i starenie vegetativnogo neyrona. M.: Nauka, 1965.- 186s. In RussianZhabotinskiy YuM. Normal’naya i patologicheskaya morfologiya neyrona. L.: Medicina, 1965.– 323s. In RussianZhabotinskiy YuM. Normal’naya i patologicheskaya morfologiya neyrona. L.: Medicina, 1965.– 323s. In RussianMarkov II, Petrov ES, Markova VI. Universal’ny metod elektivnogo vyyavleniya argirofil’nykh struktur. Morfologicheskie vedomosti. 2016;24(1):116-119. In RussianMarkov II, Petrov ES, Markova VI. Universal’ny metod elektivnogo vyyavleniya argirofil’nykh struktur. Morfologicheskie vedomosti. 2016;24(1):116-119. In RussianDogiel AS. Neuroglia der Retina des Menschen. Arch. Microscop. Anat. 1983;41:612–623Dogiel AS. Neuroglia der Retina des Menschen. Arch. Microscop. Anat. 1983;41:612–623

The authors declare that there are no conflicts of interest present.