ДИНАМИКА И ЗОНАЛЬНОЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЕ CD68⁺ МАКРОФАГОВ В ПАХОВОМ ЛИМФАТИЧЕСКОМ УЗЛЕ КРЫСЫ ПРИ ПОСТТРАВМАТИЧЕСКОЙ РЕГЕНЕРАЦИИ

ВВЕДЕНИЕ. Травма мягких тканей инициирует сложный каскад иммунных реакций в регионарных лимфатических узлах (ЛУ). Макрофаги (CD68⁺ клетки) играют ключевую роль в этих процессах.
ЦЕЛЬ: изучить закономерности динамики и зонального распределения CD68⁺ макрофагов в паховом ЛУ крысы в различные сроки после травмы мягких тканей.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Эксперимент выполнен на 50 половозрелых крысах-самцах линии Wistar (масса 220–250 г). Моделировали травму мягких тканей бедра. Животных выводили из эксперимента на 1, 3, 7 и 14 сутки после травмы (по 10 особей на каждый срок), контроль (n = 10) – интактные крысы. В ЛУ определяли CD68⁺, CD3⁺, CD19⁺, Ki67⁺, bcl2⁺ и p53⁺ клетки в 8 структурно-функциональных зонах: корковое вещество (КВ), первичные (ПЛУ) и вторичные лимфоидные узелки (ВЛУ), паракортикальная зона (ПКЗ), мозговые тяжи (МТ), субкапсулярный краевой синус (СКС), переузелковый синус (ПУС) и мозговой синус (МС). Статистическую обработку выполняли с использованием непараметрических ме-тодов: критерий Краскела–Уоллиса, критерий Данна, корреляционный анализ Спирмена, тест Джонк-хира–Терпстра, кластерный анализ и множественная регрессия (среда R 4.3.2).
РЕЗУЛЬТАТЫ. Выявлена гетерогенность динамики CD68⁺ макрофагов в зависимости от зоны лимфа-тического узла. Максимальные изменения зафиксированы в ПКЗ на 3-е и 7-е сутки, после чего начина-лось снижение. В СКС пик также приходился на 3 сутки, при этом на 1 сутки наблюдалось резкое паде-ние количества макрофагов. В МТ максимальная аккумуляция CD68⁺ клеток отмечена на 3 сутки с по-следующей нормализацией к 14 суткам. МС демонстрировал стабильно повышенный уровень CD68 с 3 по 14 сутки. Корреляционный анализ выявил сильные связи CD68 с CD3⁺ T-клетками в ПКЗ (r=0,81; p<0,001) и с CD19⁺ B-клетками в МТ (r=0,77; p<0,001), а также с маркером пролиферации Ki67 (r=0,88 в ПКЗ) и с p53 в СКС (r=0,84; p<0,001). Регрессионная модель подтвердила, что основными предикторами накопления CD68 в ПКЗ являются CD3⁺ клетки (β=0,62; p<0,001) и пролиферирующие лимфоциты (β=0,48; p<0,001). Кластерный анализ разделил зоны на три группы по характеру CD68-динамики: вы-соко- (ПКЗ, СКС), умеренно-реактивные (МТ, МС) и инертные (КВ, ПЛУ и ВЛУ).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Реакция макрофагов носит строго зональный и фазовый характер. ПКЗ выполняет роль командного центра, где макрофаги кооперируются с T-лимфоцитами для запуска адаптивного иммунного ответа. СКС является «входными воротами», где макрофаги подвергаются апоптозу после антигенного процессинга. МТ выступают эффекторным полем, где макрофаги поддерживают плаз-мобластическую трансформацию B-клеток. Выявленная гетерогенность ответа различных зон лимфа-тического узла подчеркивает их функциональную специализацию и должна учитываться при интер-претации иммуноморфологических изменений.

1. Jalkanen S, Salmi M. Lymphatic endothelial cells of the lymph node. Nat Rev Immunol. 2020 Sep;20(9):566-578. doi: 10.1038/s41577-020-0281-x. Epub 2020 Feb 24. PMID: 32094869.

2. Ohtani O, Ohtani Y. Structure and function of rat lymph nodes. Arch Histol Cytol. 2008 Sep;71(2):69-76. doi: 10.1679/aohc.71.69. PMID: 18974599.

3. Jia L, Xie Z, Zheng J, Liu L, He Y, Liu F, He Y. Morphological studies of lymphatic labyrinths in the rat mesenteric lymph node. Anat Rec (Hoboken). 2012 Aug;295(8):1291-301. doi: 10.1002/ar.22509. Epub 2012 Jun 7. PMID: 22678756.

4. Druzd D, Matveeva O, Ince L, Harrison U, He W, Schmal C, Herzel H, Tsang AH, Kawakami N, Leliavski A, Uhl O, Yao L, Sander LE, Chen CS, Kraus K, de Juan A, Hergenhan SM, Ehlers M, Koletzko B, Haas R, Solbach W, Oster H, Scheiermann C. Lymphocyte Circadian Clocks Control Lymph Node Trafficking and Adaptive Immune Responses. Immunity. 2017 Jan 17;46(1):120-132. doi: 10.1016/j.immuni.2016.12.011. Epub 2017 Jan 10. PMID: 28087238; PMCID: PMC5263259.

5. Shimba A, Ikuta K. Glucocorticoids Regulate Circadian Rhythm of Innate and Adaptive Immunity. Front Immunol. 2020 Sep 18;11:2143. doi: 10.3389/fimmu.2020.02143. PMID: 33072078; PMCID: PMC7533542.

6. Kang H, Liu T, Wang Y, Bai W, Luo Y, Wang J. Neutrophil-macrophage communication via extracellular vesicle transfer promotes itaconate accumulation and ameliorates cytokine storm syndrome. Cell Mol Immunol. 2024 Jul;21(7):689-706. doi: 10.1038/s41423-024-01174-6. Epub 2024 May 14. PMID: 38745069; PMCID: PMC11637192.

7. Wynn TA, Vannella KM. Macrophages in Tissue Repair, Regeneration, and Fibrosis. Immunity. 2016 Mar 15;44(3):450-462. doi: 10.1016/j.immuni.2016.02.015. PMID: 26982353; PMCID: PMC4794754.

8. Vannella KM, Wynn TA. Mechanisms of Organ Injury and Repair by Macrophages. Annu Rev Physiol. 2017 Feb 10;79:593-617. doi: 10.1146/annurev-physiol-022516-034356. Epub 2016 Dec 7. PMID: 27959618.

9. Lech M, Anders HJ. Macrophages and fibrosis: How resident and infiltrating mononuclear phagocytes orchestrate all phases of tissue injury and repair. Biochim Biophys Acta. 2013 Jul;1832(7):989-97. doi: 10.1016/j.bbadis.2012.12.001. Epub 2012 Dec 13. PMID: 23246690.

10. Long H, Lichtnekert J, Andrassy J, Schraml BU, Romagnani P, Anders HJ. Macrophages and fibrosis: how resident and infiltrating mononuclear phagocytes account for organ injury, regeneration or atrophy. Front Immunol. 2023 Oct 6;14:1194988. doi: 10.3389/fimmu.2023.1194988. PMID: 37868987; PMCID: PMC10587486.

11. Shen L, Zhou Y, Gong J, Fan H, Liu L. The role of macrophages in hypertrophic scarring: molecular to therapeutic insights. Front Immunol. 2025 Mar 28;16:1503985. doi: 10.3389/fimmu.2025.1503985. PMID: 40226618; PMCID: PMC11986478.

12. Wang ZC, Zhao WY, Cao Y, Liu YQ, Sun Q, Shi P, Cai JQ, Shen XZ, Tan WQ. The Roles of Inflammation in Keloid and Hypertrophic Scars. Front Immunol. 2020 Dec 4;11:603187. doi: 10.3389/fimmu.2020.603187. PMID: 33343575; PMCID: PMC7746641.

13. Kharraz Y., Guerra J., Mann C.J., Serrano A.L., Muñoz-Cánoves P. Macrophage plasticity and the role of efferocytosis in skeletal muscle regeneration. Semin. Immunol. 2017;4(5):456-464. doi: 10.1155/2013/491497.

14. Siebeler R, de Winther MPJ, Hoeksema MA. The regulatory landscape of macrophage interferon signaling in inflammation. J Allergy Clin Immunol. 2023 Aug;152(2):326-337. doi: 10.1016/j.jaci.2023.04.022. Epub 2023 Jun 3. PMID: 37271317.

15. Ross EA, Devitt A, Johnson JR. Macrophages: The Good, the Bad, and the Gluttony. Front Immunol. 2021 Aug 12;12:708186. doi: 10.3389/fimmu.2021.708186. PMID: 34456917; PMCID: PMC8397413.

16. Patent RUS № 2807925/21.11.23. Byul. № 33. Lanicheva AKh, Semchenko VV, Murzabaev KhKh, Imaeva AK. A device for simulating mechanical trauma in adult laboratory rats, comparable to a gunshot wound from a 5.6 mm caliber bullet. Available from: https://patentimages.storage.googleapis.com/66/c6/cd/e7525fdc63c260/RU2807925C1.pdf (In Russ.)