СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПРИМЕНЕНИЯ ЗАМОРОЖЕННЫХ И НАТИВНЫХ ТЕСТИКУЛЯРНЫХ СПЕРМАТОЗОИДОВ ПОСЛЕ АКТИВАЦИИ ПЕНТОКСИФИЛЛИНОМ ПРИ АЗООСПЕРМИИ

Азооспермия – это состояние при котором в эякуляте отсутствуют сперматозоиды. Цель исследования- оценить результаты применения активации пентоксифиллином сперматозоидов, полученных после тестикулярной биопсии при азооспермии и сравнить показатели эмбриологического и клинического этапов при применении нативных и замороженных сперматозоидов для оплодотворения в программах вспомогательных репродуктивных технологий. Всего было проведено 91 процедура тестикулярной биопсии с последующим микроскопическим исследованием биоптата с целью обнаружения в нем сперматозоидов. Активация неподвижных сперматозоидов осуществлялась с помощью ингибитора фосфодиэстеразы – пентоксифиллина. Проведено 20 процедур биопсии, оплодотворение осуществлялось нативными сперматозоидами (I группа). В остальных 71 случаях биопсия была диагностической и проводилась заранее. В 29 случаях сперматозоиды были найдены, криоконсервированы и в 22 случаях разморожены для проведения процедуры оплодотворения (II группа). Проведен анализ эмбриологических и клинических показателей искусственного оплодотворения, в которых использовались нативные (I группа) и замороженные (II группа) тестикулярные сперматозоиды после активации пентоксифиллином. Применение пентоксифиллина позволило отобрать для оплодотворения активно подвижные формы сперматозоидов. В соответствии с полученными данными, показатель оплодотворения оказался выше в группе с использованием нативных тестикулярных сперматозоидов по сравнению с группой, в которой оплодотворение проводили после предварительно проведенной их криоконсервации. Однако, статистически значимой разницы показателей оплодотворения в изучаемых группах выявить не удалось. Показатели преимплантационного развития эмбрионов также не показали статически значимой разницы в изучаемых группах. Применение пентоксифиллина позволяет идентифицировать жизнеспособные мужские гаметы и отбирать их для проведения оплодотворения методом интрацитоплазматического введения в яйцеклетку после проведения тестикулярной биопсии. Основной клинический показатель – частота наступления беременности оказался сопоставимым и не показал статистически значимой разницы в исследуемых группах, что свидетельствует о формировании компетентных эмбрионов при применении замороженного и нативного биологического материала яичек после активации пентоксифиллином. Замораживание тестикулярных сперматозоидов не оказывает отрицательного влияния на их способность к оплодотворению.

1. Kulikov SN, Korneev IA. Algoritmy obsledovanija pacientov s azoospermiej. Materialy 2-j nauchno-prakticheskoj konferencii urologov Severo-Zapadnogo federal'nogo okruga 21–22 aprelya 2016 goda, Cankt-Peterburg. Urologicheskie vedomosti. 2016;(Special Issue):64-65. In Russian

2. Muzhskoe besplodie. Klinicheskie rekomendacii. Rossijskoe obshchestvo urologov. 2021.- 25s. URL: http://disuria.ru/_ld/10/1013_kr21N46mz.pdf. In Russian

3. Bozhedomov VA, Lipatova NA, Sporish EA I dr. Rol’ strukturnykh narushenij khromatina i DNK spermatozoidov v razvitii besplodiya. Andrologiya i genital'naya hirurgiya. 2012;13(3):82-92. In Rus-sian

4. Vitjazeva II, Bogoljubov SV, Dedov II. Sovremennye tehnologii v lechenii azoospermii metodom mikro-dissekcii TESE v programme JeKO-IKSI. Problemy Endokrinologii. 2012;(5):66-74. In Russian

5. Matthew S Wosnitzer, Marc Goldstein. Obstructive azoospermia. Urol Clin North Am. 2014;41(1):83-95

6. Sperm retrieval for obstructive azoospermia. Practice Committee of the American Society for reproduc-tive Medicine. Fertil Steril. 2006;86(5)Suppl 1:115-120

7. Moshe Wald, Antoine A Makhlouf, Craig S Niederberger. Therapeutic testis biopsy for sperm retrieval. Curr Opin Urol. 2007;17(6):431-438

8. Gasanov NG, Gamidov SI, Shatylko TV, Popova AYu, Makarova NP, Ushakova IV, Loran OB. Rol' punkcionnoj biopsii yaichka v vedenii pacientov s azoospermiej. Issledovaniya i praktika v medicine. 2020;7(3):43-50. In Russian

9. Gamidov SI, Popova AJu, Gasanov NG I dr. Rol' metodov hirurgicheskogo poluchenija spermatozoidov u pacientov s azoospermiej v programmah vspomogatel'nyh reproduktivnyh tehnologij (obzor litera-tury). Andrologija i genital'naja hirurgija. 2018;19(3):27-34. In Russian

10. Gasanov NG, Gamidov SI, Shatylko TV i dr. Reproduktivnyj potencial spermatozoidov, poluchennyh hirurgicheskim putem u pacientov s azoospermiej. Eksperimental'naya i klinicheskaya urologiya. 2019;(3):126-132. In Russian. DOI: 10.29188/2222-8543-2019-11-3-126-132

11. WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen. Fifth ed. WHO, 2010.- 271 pp.

12. Odintsov AA, Kuchkov IN, Cherkashina IV, Potemina TE. Ispol'zovanie pentoksifillina v proce-dure intracitoplazmaticheskoj in'ekcii spermija (ICSI). Sovremennye tehnologii v medicine. 2010;(3):53-55. In Russian

13. Tamires Correia Evangelista Dutra, Daniela Scherer da Silva, Virginia Meneghini Lazzari, Alberto Stein, Joao Sabino da Cunha Filho. Activation of the mobility of human spermatozoa with the use of pentoxifylline: effects on spermal DNA. Human Reproduction Archives. 2017;32(3):e000717

14. Vinjay Mangoli, Ranjana Mangoli, Sucheta Dandekar, Kavita Suri, Sadhana Desai. Selection of viable spermatozoa from testicular biopsies: a comparative study between pentoxifylline and hypoosmot-ic swelling test. Fertil Steril. 2011;95(2):631-634. DOI: 10.1016/j.fertnstert.2010.10.007

15. Nordhoff V. How to select immotile but viable spermatozoa on the day of intracytoplasmic injec-tion? An embryologist’s view. Andrology. 2015;(2):156-162. DOI: 10.1111/andr.286

16. Rusakov DJu, Shurygina OV, Petrova AA. Opyt primenenija pentoksifillina s tsel'ju aktivatsii spermatozoidov v programmah VRT. Materialy ezhegodnoj XXIX Mezhdunarodnoj konferencii RARCh. M, 2019.- S. 56-58. In Russian

17. The Istanbul consensus workshop on embryo assessment: proceedings of an expert meeting. Alpha Scientists in Reproductive Medicine and ESHRE Special Interest Group of Embryology. Human Repro-duction. 2011;26(6):1270-1280

18. Gardner DK, Schoolcraft WB. In vitro culture of human blastocysts. Toward Reproductive Cer-tainty: Fertility and Genetics Beyond. 1999;(11):378-388

19. The Vienna consensus: report of an expert meeting on the development of ART Laboratory per-formance indicators, ESHRE Special Interest Group of embryology and Alpha Scientists in Reproduc-tive Medicine. Reprod Biomed Online. 2017;35(5):494-510. DOI: 10.1016/j.rbmo.2017.06.015

20. ChestkovVV, Bekkerova LA, Shhepkina JuV, Shilejko LV, Kurilo LF. Vybor sredy dlja vitrifikacii spermatozoidov cheloveka. Andrologija i genital'naja hirurgija. 2012;13(1):46-49. In Russian