МОДИФИКАЦИЯ МЕТОДА ИМПРЕГНАЦИИ СЕРЕБРОМ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭНТЕРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ

Отсутствие адекватных методов гистологического исследования энтеральной нервной системы является значительным препятствием для получения достоверных результатов о ее структурной организации на микроскопическом уровне. Использование классических методов импрегнации азотнокислым серебром, к сожалению, не дает удовлетворительных результатов. Цель исследования – доказать эффективность универсального метода импрегнации в идентификации меж-нейрональных цитоплазматических синцитиальных связей в структурах энтеральной нервной системы человека. Изучены суправитальные препараты стенки кишечника беспородных половозрелых кошек (n=7) и биопсийные фрагменты тонкой и толстой кишки (n=30) длиной 20 см (тонкая кишка) и длиной 10 см (толстая кишка). Фрагменты кишечника после тщательной предварительной подготовки подвергались препарированию в водной среде под стереомикроскопом. Стенка фрагментов разделялась на слизистую и мышечную оболочки, и подслизистую основу. Каждая из оболочек, мышечная, слизистая и подслизистая основа фиксировались в 10% не содержащем метанол формалине в отдельном флаконе. Небольшие фрагменты кишечной стенки обрабатывают 0,2% растворами гидроксидов бария, кальция и магния, размещением их на смоченной этими растворами стекловате. Затем на поверхность фрагментов наносят капли растворов указанных растворов. Нитрата серебра осаждают в сильнощелочной среде (pH=11–13) с использованием 4% гидрохинона в качестве восстановителя. Образование и осаждение гидроокиси серебра происходит как за счет активности самого катиона, так и за счет еще более реакционноспособного аниона. В результате образуются плохо растворимые соединения, которые осаждаются на аргирофильных структурах. Восстановленное из гидроокиси металлическое серебро в виде кристаллов откладывается в точном соответствии с локализацией и концентрацией протравных соединений. Адаптированный метод универсальной импрегнации – результат нанотехнологического принципа искусственного перенаправленного метода коррекции естественных восстановительных свойств клеточных конструкций. Разработанный способ позволяет достичь значительно лучших результатов при изучении гистологических препаратов энтеральной нервной системы по сравнению с имеющимися.

1. Auerbach L. Feinere vorlaufige Mittheilung uber den Nervenapparat des Darmes. Arch. Pathol. Anat. Physiol. Klin. Med. 1864;30(3-4):453– 466

2. Meissner G. Uber die Nerven der Darmwand. Ztschr. F. Ration Med. 1857;2(2):364–382

3. Lilli R. Patologicheskaya tekhnika i prakticheskaya gistokhimiya. Per. s angl. M.: Mir, 1969.– 645s. In Russian

4. Mazzarello P. Camillo Colgi’s Scintific Biography. I. Hist. Neurosci. 1999;8(2):2045–2060

5. Dogel' AS. Tekhnika okrashivaniya nervnoy sistemy metilenovoy sin’yu. SPb: Izd-vo K.L. Rikkera, 1902.- 48s. In Russian

6. Sotnikov OS. Ob"edinennaya neyro-retikulyarnaya teoriya. SPb: Nauka, 2019.– 239s. In Russian

7. Kolosov NG. Nervnaya sistema pishchevaritel’nogo trakta pozvonochnykh zhivotnykh. L.: Nauka, 1978.- 140s. In Russian

8. Fayrter F. Uber die Pathologic Vegetativen nervous peripheral und ihren ganglionaren Regulatios. Wien, 1951.- 273S

9. Korochkin LI. Differentsirovka i starenie vegetativnogo neyrona. M.: Nauka, 1965.- 186s. In Russian

10. Zhabotinskiy YuM. Normal’naya i patologicheskaya morfologiya neyrona. L.: Medicina, 1965.– 323s. In Russian

11. Markov II, Petrov ES, Markova VI. Universal’ny metod elektivnogo vyyavleniya argirofil’nykh struktur. Morfologicheskie vedomosti. 2016;24(1):116-119. In Russian

12. Dogiel AS. Neuroglia der Retina des Menschen. Arch. Microscop. Anat. 1983;41:612–623